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技術(shù)文章

Technical articles
  • 2014

    3-21

    核酸分離與純化的原則

    材料與方法的選擇(一)材料與方法的選擇臨床常見的標(biāo)本有血液,尿液,唾液,組織及培養(yǎng)細(xì)胞等;核酸分離與純化的方法非常多,如何恰當(dāng)?shù)厥占c準(zhǔn)備材料,選擇適宜的分離與純化方法是一個(gè)首要的問題。首先我們應(yīng)當(dāng)明確核酸的分離與純化并不是zui終的目的,不同的實(shí)驗(yàn)研究與應(yīng)用對(duì)核酸的產(chǎn)量,完整性,純度和濃度可能有不同的要求;至于分離與純化核酸所需的時(shí)間與成本也往往需要考慮;在不影響核酸質(zhì)量的情況下,應(yīng)選擇安全無(wú)毒的試劑與方案。近年來(lái),有關(guān)試劑盒的開發(fā)與自動(dòng)化儀器的使用,能批量制備核酸樣品,大...
  • 2014

    3-17

    細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)原理

    細(xì)胞凋亡的實(shí)驗(yàn)原理細(xì)胞膜是一選擇性的生物膜,一般的生物染料如PI等不能穿過質(zhì)膜。當(dāng)細(xì)胞壞死時(shí),質(zhì)膜不完整,PI就進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)部,它可嵌入到DNA或RNA中,使壞死細(xì)胞著色,凋亡細(xì)胞和活細(xì)胞不著色。而一些活細(xì)胞染料由于為親脂性物質(zhì),可跨膜進(jìn)入活細(xì)胞,因而可進(jìn)行活細(xì)胞染色。Hoechst33342是一種活性熒光染料且毒性較弱,它是雙苯并咪唑的一種衍生物。與DNA特異結(jié)合(主要結(jié)合于A-T)堿基區(qū)),顯示凋亡細(xì)胞和活細(xì)胞。凡是看到有凋亡小體的細(xì)胞都是凋亡細(xì)胞。細(xì)胞死亡根據(jù)其性質(zhì)、起源...
  • 2014

    3-11

    動(dòng)物檢驗(yàn)檢疫中定量的核酸檢測(cè)技術(shù)

    在動(dòng)物檢驗(yàn)檢疫中核酸檢測(cè)技術(shù)大多數(shù)無(wú)需要求定量,所以在這只作簡(jiǎn)單介紹。核酸檢測(cè)的定量化在人醫(yī)臨床和動(dòng)物疫病基礎(chǔ)研究中應(yīng)用較多,可用于病情評(píng)估、療效預(yù)測(cè)和觀察及預(yù)后判斷、疫病的病理分析,具有一定的應(yīng)用價(jià)值。核酸的定量檢測(cè)一般有以下兩種方法。(1)定量的核酸雜交技術(shù)此類技術(shù)以分支鏈DNA信號(hào)放大技術(shù)(branchedDNAsignalamplificationassay,bDNA)為典型代表,bDNA技術(shù)系美國(guó)Chiron公司的,屬于一種改良的核酸雜交技術(shù),它定量的基本原理是樣品...
  • 2014

    3-7

    上海恒遠(yuǎn)告知:抗磷脂抗體檢測(cè)方法

    檢測(cè)APLAzui敏感試驗(yàn)是1983年介紹的ACLA的檢測(cè),后來(lái)這種方法得到不斷改進(jìn),血清、血漿均可用于分析。該方法即為酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)(ELISA):用純心磷脂的無(wú)水乙醇溶液(50/11)包被聚苯乙烯反應(yīng)板,常規(guī)方法洗滌后,用10%的BSA封閉;加l:50稀釋的待測(cè)血清,37~C孵育30rain;洗板后,再分別加入HRP標(biāo)記的抗人γ(1:1500)、抗α(1:1000)、抗μ(1;8000)鏈的F(ab)2片段,37℃30min然后,OPD顯色,加終止液。492nm波長(zhǎng)測(cè)吸...
  • 2014

    3-3

    ELISA常用結(jié)果判定的方法

    1.定性測(cè)定(1)陽(yáng)性判定值法(cut-offvalue,CO值):一般為陰性對(duì)照的平均A值加一個(gè)常數(shù),試劑制備嚴(yán)格標(biāo)準(zhǔn)化,要先計(jì)算出陽(yáng)性對(duì)照A值平均數(shù)和陰性對(duì)照A值平均數(shù)。標(biāo)本A值≥CO值即為陽(yáng)性。(2)抑制率法:在競(jìng)爭(zhēng)抑制法中結(jié)果可用抑制率表示。抑制率(%)=(A陰性對(duì)照A-A待測(cè))/陰性對(duì)照X100%,一般以抑制率≥50%為陽(yáng)性2。半定量測(cè)定結(jié)果一般以滴度表示。將標(biāo)本連續(xù)稀釋后,進(jìn)行ELISA檢測(cè),在陽(yáng)性臨界值以上的zui高稀釋度即為該標(biāo)本的“滴度”。3。定量測(cè)定即用己...
  • 2014

    2-28

    酶標(biāo)儀使用注意事項(xiàng)

    1、工作環(huán)境酶標(biāo)儀是一種精密的光學(xué)儀器,因此良好的工作環(huán)境不僅能確保其準(zhǔn)確性和穩(wěn)定性,還能夠延長(zhǎng)其使用壽命。A.儀器應(yīng)放置在無(wú)強(qiáng)磁場(chǎng)和干擾電壓的位置。B.儀器應(yīng)放置在噪音低于40分貝的環(huán)境下。C.為延緩光學(xué)部件的老化,應(yīng)避免陽(yáng)光直射。D.操作環(huán)境溫度應(yīng)在15°C~40°C之間,環(huán)境濕度在15%~85%之間。E.操作時(shí)電壓應(yīng)保持穩(wěn)定。F.操作環(huán)境空氣清潔,避免水汽、煙塵。G.保持干燥、干凈、水平的工作臺(tái)面,以及足夠的操作空間。2、操作注意事項(xiàng)許多醫(yī)院在使用酶標(biāo)儀之前是通過目測(cè)判...
  • 2014

    2-24

    姬姆薩復(fù)合染液常見問題

    姬姆薩復(fù)合染液常見問題:Q1:如需冷藏,冷凍保存時(shí),具體應(yīng)保存在幾度(℃)的好?A1:我們推薦的冷藏保存溫度為0℃~10℃之間,冷凍保存的溫度在0℃以下。如未注明保存溫度,原則上保存在15℃以下的陰涼處。Q2:我想知道產(chǎn)品的使用期限?A2:原則上來(lái)說,并沒有設(shè)定試劑的使用期限或保質(zhì)期限。因?yàn)樵噭?huì)因保管條件或其中混入的極微量不純物等的原因,產(chǎn)生經(jīng)時(shí)變化,因此很難嚴(yán)格斷定使用期限或保質(zhì)期限。Q3:為什么標(biāo)有冷藏保存的產(chǎn)品沒有用冷藏運(yùn)輸呢?A3:并不是說保存時(shí)的溫度條件與運(yùn)輸時(shí)的...
  • 2014

    2-20

    恒遠(yuǎn)生物告知:胎牛血清(FBS)的作用

    胎牛血清是品質(zhì)zui高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分zui少;牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中用量zui大的天然培養(yǎng)基,含有豐富的細(xì)胞生長(zhǎng)必須的營(yíng)養(yǎng)成份,常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有極為重要的功能。1、提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。2、提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類、金屬和其他激素等,能結(jié)合或調(diào)變它們所結(jié)合的物質(zhì)活力。3、有些情況下結(jié)合蛋白質(zhì)能與有毒金屬和熱原質(zhì)結(jié)合,起到解毒作用。4、是細(xì)胞貼...
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